结核杆菌聚合酶链式反应

结核杆菌可以做结核杆菌聚合酶链式反应，那么结核杆菌聚合酶链式反应的原理是什么呢？

结核杆菌聚合酶链式反应以人型结核杆菌基因组 DNA 为模板，合成二段引物各20个碱基进行聚合酶链式反应，经琼脂糖凝胶电泳证实，获得一条245bp扩增带。PCR 检测的敏感性染色体基因组DNA 为1pg，菌悬液为13个活菌/ml，在特异性试验中，人型结核杆菌，牛型结核杆菌，BCG可见此扩增带，被试的其它14种抗酸菌以及变铅青链霉菌，大肠杆菌质粒 PUC19，星状诺卡氏菌，红球菌均未见该扩增带。

目前54例肺结核痰标本3种方法检查的阳性率分别为：萋尼氏抗酸染色16.7%，培养法14.8%，PCR 37.0%。前2种检查方法分别与 PCR 比较，经统计学处理均有显著性差异(P0.01)，12例非结核性肺部疾患痰标本抗酸染色和 PCR 均为阴性。结果表明，聚合酶链式反应是快速，敏感，特异诊断结核病的方法。

结核杆菌聚合酶链式反应结果比较精准，那么结核杆菌聚合酶链式反应的操作过程是什么样的呢？

结核杆菌聚合酶链式反应的操作过程：模板DNA加热变性；引物与它的靶序列发生退火，引物DNA量多，使引物和模板在局部形成杂交链；4种dNTP 与 Mg2+ 存在的条件下，DNA合成酶催化以引物为起始点，按5-3方向进行延伸。上面三步为一个循环，可使拷贝数到达2*Ｅ－6-2*Ｅ－7。

结核分枝杆菌，俗称结核杆菌，是引起结核病的病原体。其细菌壁既没有革兰阳性菌的磷壁酸，也没有革兰阴性菌的脂多糖。1882年由德国细菌学家郭霍发现并证明为人类结核病的病原菌，该菌可侵犯全身各器官，但以引起肺结核最多见。结核病是一种古老的疾病，全球广泛分布，是细菌感染性疾病致死的首位原因。

结核杆菌是能致病的一种菌种，那么关于结核杆菌聚合酶链式反应是什么意思呢？

结核杆菌聚合酶链式反应是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，用于检测结核杆菌的情况。结核病是由于结核分枝杆菌引起的慢性传染病。结核分枝杆菌，俗称结核杆菌，它十分小且看不到，但危害非常大。结核分枝杆菌在人体血液和氧气充足的部位繁殖最快，因此常见于肺部。

结核杆菌毒力弱，人体抵抗力强，人体抵抗力会将结核杆菌直接杀死，人体没有任何症状，不会发病，不被我们所察觉。结核病中最常见的是发生在肺部的结核，即肺结核，它占所有结核病的85%左右。除了肺结核，还有肺外其他部位发生的结核，包括肠结核、骨结核、神经系统结核、脑结核等等，这些结核病占所有结核病的15%左右。

结核杆菌聚合酶链式反应不是什么情况都准确的，那么结核杆菌聚合酶链式反应的局限性是什么呢？

结核杆菌聚合酶链式反应的反转录酶活性需要二价锰离子，而二价锰离子会降低ＤＮＡ聚合酶的忠实性，DNA聚合酶，又称DNA依赖的DNA聚合酶，它是以亲代DNA为模板，催化底物dNTP分子聚合形成子代DNA的一类酶。此酶最早是美国科学家Arthur Komberg于1957年在大肠杆菌中发现的，被称为DNA聚合酶Ⅰ（DNA polymerase Ⅰ，简称polⅠ）以后陆续在其他原核生物及真核生物中找到了多种DNA聚合酶。

这些DNA聚合酶的共同特征为：具有5’→3’聚合酶活性，这就决定了DNA只能沿着5’→3’方向合成；需要引物，DNA聚合酶不能催化DNA新链从头合成，只能催化dNTP加入核苷酸链的3-OH末端。因而复制之初需要一段DNA引物的3’一OH端为起点，合成5’→3’方向的新链。